Servicios y Plataformas

Citometría de Flujo y Separación Celular

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La Unidad de Citometría de Flujo y Separación Celular del ISPA ofrece apoyo técnico y asesoramiento a los grupos de investigación del instituto o a investigadores visitantes interesados en la citometría de flujo, para el diseño de experimentos, selección de marcadores, adquisición y análisis de muestras y discusión de los resultados obtenidos.

Los principales servicios ofrecidos son:

  • Estudios fenotípicos mediante el marcaje de antígenos en superficie e intracitoplásmicos.
  • Medida de la viabilidad celular a través del uso de marcadores vitales (IP, 7AAD, fixable viability dyes, etc).
  • Determinación de apoptosis celular en respuesta a compuestos bioactivos (Anexina V, Caspasa3)
  • Determinación de poblaciones genéticamente modificadas a través de genes reporteros (GFP principalmente).
  • Determinación de las distintas fases del ciclo celular con ioduro de propidio (IP)
  • Cuantificación de la proliferación celular (Brdu, ki67, etc)
  • Medida de autofagia en líneas celulares (Medida de la proteína LC3, CytoID©, etc.)
  • Estudio de moléculas solubles con el uso de microesferas (cytometric bead array “CBA”)
  • Determinación de microvesículas basado en microesferas magnéticas.
  • Aislamiento de poblaciones celulares (en tubo/en placa/ célula única) mediante tecnología FACS (“Fluorescence Activated Cell Sorting”).

 

Además, la Unidad trabaja en el desarrollo de nuevas tecnologías y evaluación de nuevos equipos y organiza actividades de formación y divulgación sobre citometría de flujo para usuarios.

Laboratorio Citometría N-1 F.40. Sede ISPA

Av. Roma s/n 33011-Oviedo

Teléfono: +34 985652413 (Extensión 39793)

Email: cmartinsorting@finba.es

Cristina Martín Martín

  • Licenciada en Bioquímica, Facultativa Especialista en Inmunología
  • Técnico especialista en citometría de flujo y sorting
  • Miembro de la Sociedad Ibérica de Citometría (SIC)

 La unidad de citometría de flujo del ISPA, está compuesta por un citómetro de flujo FACS Aria IIu, compatible para estudios fluorométricos de hasta 8 parámetros y separación celular electroestática, compuesto por:

  • Láser  488nm (con detectores para FITC,  Pe,  PerCP/Pe-Cy5/PercP-Cy5.5, Pe-Cy7 más dispersión frontal, FSC y lateral, SSC) compatible también con Alexa 488, IP, 7AAD, CFSE, GFP y Rhodamina 123.
  • Láser  633nm (con detectores APC, APC-H7/APC-Cy7) compatible con DRAQ5, DRAQ7, Alexa 647, Alexa 750.
  • Bloque de “sorting” con capacidad para 4 tubos de colección simultánea y aislamiento en placa (posibilidad de single cell).
  • Software de análisis Facs Diva V8.02., que incorpora el módulo de control de calidad CST para optimizar los voltajes y realizar seguimiento de los  parámetros de funcionamiento del equipo.
Equipo de Citometría de Flujo y Sorting Facs Aria IIu (BD Bioscience)
  • Los usuarios podrán solicitar el uso del citómetro para adquisición o separación celular, o bien sólo de la plataforma de análisis, al personal de la unidad de Lunes a Viernes en horario de 9 a 16h.
  • El uso y manejo del equipo serán llevados a cabo por el personal técnico del servicio.
  • En caso de necesitar su uso fuera del horario marcado, se podrá acordar un horario prefijado para tal fin.
  • Antes de solicitar los servicios de la Plataforma de Citometría recomendamos consultar el documento de Recomendaciones previas
  • Se deberá rellenar una solicitud por cada petición, que irá firmada por el investigador principal y será entregada al personal del servicio (bien en mano o a través del email de la unidad): Solicitud servicio Citometría
  • Si es la primera vez que se solicita el servicio, es necesario rellenar igualmente el Cuestionario de Bioseguridad.
  • El día y hora adjudicados irán en función de la disponibilidad y compatibilidad con otras reservas, que marcará el personal de la unidad y se regirá exclusivamente por orden de solicitud.
  • Sólo se admitirán reservas que se realicen con una antelación mínima de 3 días laborables.
  • Dado que todo tipo de reserva, conlleva el encendido del equipo y calibración, las cancelaciones también deberán realizarse con un día de antelación. De no ser así, se efectuarán cargos acordes a las tarifas establecidas.
Usuario  (procedencia)Análisis de archivos .fcsAdquisición de muestras preparadasSeparación en muestras preparadas
ISPA3 €/hora15 €/hora45 €/hora
Organismos públicos (HUCA,Uniovi, otros)5 €/hora25 €/hora75 €/hora
Organismos externos10 €/hora35 €/hora100 €/hora

 

(Los precios no incluyen IVA)